Seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in central-western Brazil / Soroprevalência e alterações hematológicas associadas com Ehrlichia canis em cães encaminhados a um hospital veterinário-escola no centro-oeste do Brasil

Ticks are significant parasites of dogs in the tropics, where tick-borne pathogens are highly prevalent, especially in areas where tick control measures are frequently neglected. This study investigated the seroprevalence and hematological abnormalities associated with Ehrlichia canis in dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil. Out of 264 dogs tested for anti-Ehrlichia canis antibodies by an indirect immunofluorescence assay (IFA), 59.1% (156/264) were positive. Seropositivity was significantly associated to anemia and thrombocytopenia, alone or in combination, and to leukopenia. Conversely, there were no differences in terms of seroprevalence according to sex, breed and age. This study demonstrated that dogs referred to a veterinary teaching hospital in Central-western Brazil are highly exposed to E. canis and that seropositive dogs are more likely to present hematological abnormalities, particularly anemia, thrombocytopenia and leukopenia. To our knowledge, this is the first study on detection of anti-E. canis antibodies by means of IFA among dogs in the state of Goiás. These findings highlighted the need for increasing awareness among dog owners regarding tick control measures in Central-western Brazil, ultimately to reduce the risk of exposure to E. canis and other tick-borne pathogens.

Carrapatos são importantes parasitos de cães nos trópicos, onde patógenos transmitidos por carrapatos são altamente prevalentes, especialmente em áreas onde as medidas de controle de carrapatos são frequentemente negligenciadas. O estudo investigou a soroprevalência e as anormalidades hematológicas associadas à Ehrlichia canis em cães encaminhados para um hospital veterinário-escola no Centro-oeste do Brasil. Dos 264 cães testados para anticorpos anti-Ehrlichia canis por meio da reação de imunofluorescência indireta (RIFI), 59.1% (156/264) foram positivos. A soropositividade foi associada significativamente à anemia e trombocitopenia, isoladamente ou em combinação, e à leucopenia. Por outro lado, não houve diferenças quanto à soroprevalência segundo sexo, raça e idade. Este estudo demonstrou que cães encaminhados a um hospital veterinário-escola na região Centro-oeste do Brasil são altamente expostos à E. canis, e que cães soropositivos têm maior probabilidade de apresentar alterações hematológicas, principalmente anemia, trombocitopenia e leucopenia. Para o nosso conhecimento, este é o primeiro estudo sobre a detecção de anticorpos anti-E. canis por meio da RIFI em cães do estado de Goiás. Essas descobertas destacam a necessidade de aumentar a conscientização entre os proprietários de cães em relação às medidas de controle do carrapato no Centro-oeste do Brasil, em última análise, para reduzir o risco de exposição ao E. canis e outros patógenos transmitidos por carrapatos.

Soroprevalência de Ehrlichia canis em cães de abrigos e associações de proteção, do oeste do Paraná, Brasil / Soroprevalence of Ehrlichia canis in dogs from shelters and protection associations in western Paraná, Brazil / Soroprevalencia de Ehrlichia canis en perros de refugios y asociaciones de protección, del oeste de Paraná, Brasil

A erliquiose é uma doença riquetsial infecciosa causada por uma bactéria, pertencente ao gênero Ehrlichia, muito comum em cães e considerada uma importante hemoparasitose. Devido sua relevância na população canina e fácil transmissão por meio de carrapatos, mostra-se necessário conhecer melhor os aspectos epidemiológicos desta doença. Este estudo teve como objetivo avaliar a prevalência de Ehrlichia canis e os aspectos hematológicos em cães de abrigos temporários, de associações de proteção aos animais abandonados, nos municípios de Palotina e Guaíra, no Paraná. No total, 60 cães foram submetidos à coleta de amostras sanguíneas, para realização de hemograma e imunoflourescência indireta para detecção dos anticorpos anti-E. canis. A prevalência encontrada foi de 60% (36/60), não houve correlação positiva com relação ao sexo dos animais, presença de carrapatos ou trombocitopenia. Os dados revelam uma alta prevalência desta doença parasitária em cães de abrigos e a necessidade do estabelecimento de medidas de controle dos agentes transmissores.(AU)

Ehrlichiosis is an infectious ricketsial disease caused by bacteria belonging to the Ehrlichia genus. It is very common in dogs and is considered as an important hemoparasitosis. Due to its relevance in the canine population and its easy transmission through ticks, it is necessary to further understand the epidemiological aspects of the disease. This study aimed at evaluating the prevalence of Ehrlichia canis and the hematological aspects in dogs from temporary shelters and associations for the protection of abandoned animals in the cities of Palotina and Guaíra, in the state of Paraná. Blood samples were collected from 60 dogs for blood count and indirect immunofluorescence testing, and detection of anti-E. canis antibodies. A prevalence of 60% (36/60) was found, with no positive correlation regarding the gender of the animals, presence of ticks, or thrombocytopenia. The data reveal a high prevalence of this parasitic disease in shelter dogs and the need to establish control measures related to the transmitting agents.(AU)

Ehrlichiosis es una enfermedad ricketsial infecciosa causada por una bacteria perteneciente al género Ehrlichia, muy frecuente en perros y considerada una importante hemoparasitaria. Debido a su relevancia en la población canina y fácil transmisión a través de garrapatas, es necesario conocer mejor los aspectos epidemiológicos de esta enfermedad. Este estudio tenía como objetivo evaluar la prevalencia de Ehrlichia canis, así como los aspectos hematológicos para la protección de animales abandonados en los municipios de Palotina y Guaíra, Paraná. Un total de 60 perros fueron sometidos a muestras de sangre para el recuento sanguíneo y la inmunoflourescencia indirecta detección de anticuerpos anti-E canis. La prevalencia encontrada fue del 60% (36/60), sin correlación positiva con la el sexo de los animales, la presencia de garrapatas o trombocitopenia. Los datos revelan una alta prevalencia de esta enfermedad parasitaria en perros refugio y la necesidad de establecer medidas de control para los agentes transmisores.(AU)

Differential diagnoses in 83 dogs with icterus / Diagnósticos diferenciais em 83 cães com icterícia

Icterus (jaundice) is a yellowish pigmentation resulting from the depositing of bilirubin in tissues due to its high plasmatic concentration. The pathogenesis of icterus includes metabolic changes or obstructed bilirubin excretion and it is classified as pre-hepatic, hepatic and post-hepatic. This study aimed to evaluate and classify different causes of icterus in dogs during post mortem examination. These dogs were examined from 2014 to 2017, using macroscopic and histologic exams as well as ancillary tests. Eighty-three dogs were examined macroscopically and microscopically. They were separated into groups of icterus types: 24 (28.9%) dogs had pre-hepatic icterus, 45 (54.2%) had hepatic, 13 (15.7%) pre-hepatic and hepatic and one (1.2%) had post-hepatic icterus. Many factors were identified as a cause of icterus, including infectious agents (51/83), neoplasms (13/83), hepatic degeneration (11/83), chronic hepatic diseases (6/83), and obstructive causes (1/87). Among the infectious causes, leptospirosis, ehrlichiosis and disorders suggestive of septicemia were diagnosed. Neoplasms associated with icterus were cholangiocarcinoma, hemangiosarcoma and lymphoma. Other causes of icterus included degenerative diseases, such as lipidosis and glycogen degeneration. Hepatic fibrosis (cirrhosis) as a chronic disease and cholelithiasis also produced icterus. PCR was performed to confirm leptospirosis and ehrlichiosis. Samples of total DNA were used to amplify a fragment of a gene from Leptospira interrogans and Ehrlichia canis. In some dogs, co-infection of these agents was detected. The classification and identification of icterus etiologies in dogs is very important due to the number of diseases with this alteration, where ante mortem diagnosis is not always easily performed when some of these conditions are present.(AU)

Icterícia é a pigmentação amarelada decorrente da deposição de bilirrubina em tecidos devido à elevada concentração plasmática. A patogênese da icterícia inclui alterações no metabolismo ou na excreção de bilirrubina, sendo classificada em pré-hepática, hepática ou pós-hepática. O objetivo desse estudo foi identificar, avaliar e classificar as causas de icterícia em cães necropsiados de 2014 a 2017, associando as lesões macroscópicas, histológicas e exames complementares. Foram avaliados macro- e microscopicamente 83 cães com diferentes intensidades de icterícia. Os cães foram separados em grupos de acordo com o tipo de icterícia: 24 (28,9%) cães com icterícia pré-hepática, 45 (54,2%) cães com icterícia hepática, 13 (15,7%) com icterícia pré-hepática e hepática e um (1,2%) com icterícia pós-hepática. Foram identificadas várias etiologias associadas à icterícia, dentre elas pode-se destacar, agentes infecciosos (51/83), neoplasmas (13/83), processos degenerativos (11/83), crônicos (6/83) e obstrutivos (1/83). Dentre as causas infecciosas, destacam-se a leptospirose, a erliquiose e as lesões sugestivas de septicemia. Entre os neoplasmas associados com icterícia destacaram-se o colangiocarcinoma, hemangiossarcoma e linfoma. Outras causas de icterícia incluiriam os processos degenerativos como as degenerações gordurosa e glicogênica. Fibrose hepática (cirrose) e colelitíase foram também diagnosticados como causa de icterícia. A PCR foi utilizada para o diagnóstico confirmatório de leptospirose e erliquiose. Amostras de DNA total foram utilizadas para amplificar um fragmento dos genes de Leptospira interrogans e de Ehrlichia canis. Em alguns cães foi detectada co-infecção por estes agentes. A classificação e a identificação das causas de icterícia em cães são relevantes devido ao grande número de doenças que apresentam essa alteração, muitas vezes sem diagnóstico ante mortem.(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil / Detecção de um suposto novo genótipo de Ehrlichia sp. em gambás (Didelphis aurita) do Brasil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors' knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Ehrlichia spp. infection in domestic cats from Rio de Janeiro State, southeast Brazil / Infecção de Ehrlichia spp. em gatos domésticos da Grande Rio de Janeiro, sudeste do Brasil

Abstract Ehrlichiosis is caused by agents belonging to Ehrlichia genus. Despite the frequent reports on the serological and molecular detection of E. canis in dogs in Brazil, there is scant data on ehrlichiosis in brazilian cats. This study aimed at investigating the occurrence of Ehrlichia spp. in domestic cats from Greater Rio de Janeiro, and evaluating hematological changes associated with this rickettsial infection. We searched for IgG antibodies against E. canis on blood samples of 216 cats by Indirect Fluorescence Assay (IFA). Additionally, we performed nested PCR (nPCR) and real-time PCR (qPCR) assays targeting E. canis-16S rRNA and dsb gene, respectively. Fifty-seven (26.4%) cats were seropositive for Ehrlichia spp. by IFA. Ehrlichia spp.-16S rRNA gene fragments were detected in 3 cats (1.4%). Although the obtained 16S rRNA sequences showed 99 to 100% identity with E. canis, cats were negative in qPCR. Anemia, thrombocytopenia, leukocytosis, left shift neutrophil and hyperproteinemia were observed. Anemia was statistically associated with seropositivity to E. canis and kittens showed lower positivity rates (p<0.05). This study showed that Ehrlichia spp. occur in domestic cats from Greater Rio de Janeiro. Further studies involving culture isolation are much needed to more precisely characterize these organisms.

Resumo A erliquiose é causada por agentes pertencentes ao gênero Ehrlichia . Apesar dos frequentes relatos de detecção sorológica e molecular de E. canis em cães no Brasil, existem poucos dados sobre a erliquiose em gatos brasileiros. Este estudo teve como objetivo investigar a ocorrência de Ehrlichia spp. em gatos domésticos do Grande Rio de Janeiro e avaliar as alterações hematológicas associadas a essa infecção rickettsial. Procuramos anticorpos IgG anti-E. canis em amostras de sangue de 216 gatos por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Além disso, foram realizados ensaios de nested PCR (nPCR) e PCR em tempo real (qPCR) para detecção dos genes E. canis-16S rRNA e dsb , respectivamente. Cinquenta e sete (26,4%) gatos foram soropositivos para Ehrlichia spp. pela RIFI. Fragmentos do gene rRNA de Ehrlichia spp.-16S foram detectados em 3 gatos (1,4%) por ensaios de nPCR. Embora as sequências 16S rRNA obtidas tenham 99 a 100% de identidade com E. canis, os gatos foram negativos nos ensaios de qPCR. Anemia, trombocitopenia, leucocitose, desvio nuclear neutrofílico à esquerda e hiperproteinemia foram observados. Anemia foi estatisticamente associada à soropositividade para E. canis e filhotes apresentaram menores taxas de positividade (p <0,05). Este estudo demonstra que Ehrlichia spp. ocorrem em gatos domésticos da Grande Rio de Janeiro. Outros estudos envolvendo o isolamento por cultura são necessários para caracterizar com mais precisão esses organismos.

Molecular detection of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in dogs from municipality of Belém, State of Pará, Brazil / Detecção molecular de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães do município de Belém, Estado do Pará, Brasil

ABSTRACT: The occurrence of diseases transmitted by ticks in dogs is very frequent in Brazil, among these diseases we can highlight the ehrlichiosis and anaplasmosis, which are caused by Ehrlichia canis and Anaplasma platys, respectively. The objective of this study was to survey the occurrence of these pathogens in blood samples from domiciled and stray dogs from the city of Belém, Pará. Two hundred and seventy six dogs were sampled for convenience, and the DNA extracted from the blood of these animals was submitted to nested-PCR for research of E. canis and A. platys. E. canis DNA was detected in 39.4% (109/276) and A. platys DNA in 23.1% (64/276) of the samples, there was a statistically significant difference between the frequency of these agents (P<0.0001), and there was coinfection in 13.4% (37/276) of animals. The frequency of detection of these parasites was higher in stray dogs than in those domiciled for both E. canis (OR=2.84) and A. platys (OR=10.5). Considering the results, it was possible to conclude that E. canis and A. platys are present in the studied population, with stray dogs being more affected by these parasites.

RESUMO: A ocorrência de doenças transmitidas por carrapatos em cães é muito frequente no Brasil, dentre estas enfermidades podemos destacar a erliquiose e a anaplasmose, que são causadas por Ehrlichia canis e Anaplasma platys, respectivamente. O objetivo deste trabalho foi fazer um levantamento da ocorrência destes patógenos em amostras de sangue de cães domiciliados e errantes do município de Belém, Pará. Foram amostrados 276 cães por conveniência, sendo que o DNA extraído do sangue desses animais foi submetido à nested-PCR para a pesquisa de E. canis e A. platys. O DNA de E. canis foi detectado em 39,4% (109/276), e o DNA de A. platys em 23,1% (64/276) dos cães amostrados. Houve diferença estatisticamente significante entre a frequência desses agentes (p<0,0001), pois foi encontrada coinfecção entre os agentes em 13,4% (37/276) dos animais. A frequência de detecção desses parasitos foi maior em cães errantes do que nos domiciliados tanto para E. canis (OR=2,84) quanto para A. platys (OR=10,5). Diante dos resultados, foi possível concluir que E. canis e A. platys estão presentes na população canina estudada, sendo os cães errantes mais acometidos por esses parasitos.

Levantamento das doenças registradas em cães no município de Poções-Ba / Survey of diseases registered in dogs in the municipality of Poções-Ba / Levantamiento de las enfermedades registradas en perros en el municipio de Poções-Ba

Diversas patologias podem atingir os cães e afetar tanto a rotina do animal quanto a do seu dono. Fatores como raça, sexo e estação do ano podem intensificar o aparecimento de certas doenças. Este artigo teve como objetivo identificar a ocorrência das doenças registradas em cães atendidos em uma clínica veterinária no município de Poções ­ BA e verificar se fatores como raça, sexo e estação climática interferem no aparecimento de determinadas enfermidades. Para isso foram analisadas fichas de atendimentos durante os meses de outubro de 2016 a setembro de 2017. Dentre as doenças registradas as infecciosas, gastrointestinais e dermatológicas foram as mais frequentes. Com prevalência alta para erliquiose, verminose, cinomose, intoxicação alimentar, dermatite infecciosa e tumor venéreo transmissível (TVT). Foi verificado que os cães sem raça definida foram mais acometidos por erliquiose, enquanto os com raça definida por intoxicação alimentar seguida de erliquiose. Não existe predisposição sexual para as doenças: erliquiose, cinomose, intoxicação alimentar, TVT e verminose. Enquanto que a estação climática influenciou no aparecimento de doenças como doenças dermatológicas, erliquiose e TVT. Sugere-se realização de ações conscientizadoras para a população sobre medidas preventivas, principalmente para erliquiose e intoxicação alimentar a fim de diminuir o número de casos.(AU)

Several pathologies can affect dogs and affect both the routine of the animal and that of its owner. Factors such as breed, gender and season may intensify the onset of certain diseases. The objective of this study was to identify the occurrence of diseases recorded in dogs treated at a veterinary clinic in the city of Poções - BA and to verify if factors such as breed, gender and season interfere with the appearance of certain diseases. For that, the attendance records for the months of October 2016 to September 2017 were analyzed. Among the recorded diseases, infectious, gastrointestinal and dermatological diseases were the most frequent ones, with high prevalence for ehrlichiosis, worms, canine distemper, food poisoning, infectious dermatitis and transmissible venereal tumor (TVT). It could be observed that mongrel dogs were more affected by ehrlichiosis, while other dogs were mostly affected by food poisoning followed by ehrlichiosis. No gender predisposition for ehrlichiosis, distemper, food poisoning, TVT and worms could be observed. However, the season influenced the appearance of diseases such as dermatological diseases, ehrlichiosis and TVT. It is suggested that awareness-raising actions be carried out for the population regarding preventive measures, especially for ehrlichiosis and food poisoning, in order to reduce the number of cases.(AU)

Diversas patologías pueden afectar perros y provocar alteraciones en la rutina del animal y de su dueño. Factores como raza, sexo y estación del año pueden intensificar la aparición de algunas enfermedades. Ese artículo ha tenido como objetivo identificar la ocurrencia de enfermedades registradas en perros atendidos en una clínica veterinaria en el municipio de Poções ­ BA, así como verificar si factores como raza, sexo y estación climática interfieren en la aparición de determinadas enfermedades. Se ha analizado fichas de atendimientos durante los meses de octubre de 2016 a septiembre de 2017. Entre las enfermedades registradas están las más frecuentes como las infecciosas, gastrointestinales y dermatológicas. Con destaque para erliquiosis, verminosis, cinomosis, intoxicación alimentar, dermatitis infecciosa y tumor venéreo transmisible (TVT). Se verificó que los perros sin raza definida fueron los más acometidos por erliquiosis, mientras los con raza definida por intoxicación alimentar seguida de erliquiosis. No existe predisposición sexual para las enfermedades erliquiosis, cinomosis, intoxicación alimentar, TVT y verminosis. Sin embargo la estación climática influenció en la aparición de enfermedades dermatológicas, erliquiosis y TVT. Se sugiere realización de acciones concientizadas a la población sobre medidas preventivas, principalmente para erliquiosis e intoxicación alimentar a fin de disminuir el número de casos.(AU)

Antibodies against canine distemper virus, parvovirus and Ehrlichia spp. in wild captive carnivores in midwestern Brazil / Anticorpos contra o vírus da cinomose canina, parvovírus e Ehrlichia spp. em carnívoros selvagens cativos no centro-oeste do Brasil

The occurrence of antibodies against canine distemper virus (CDV), parvovirus and Ehrlichia spp. in wild captive carnivores was evaluated in a zoological park in midwestern Brazil. Serum samples were collected between 2007 and 2014 from 45 carnivores. Antibodies were evaluated by virus neutralization assay for CDV, hemagglutination inhibition test for parvovirus, indirect immunofluorescent and Enzyme-linked immunosorbent assay for Ehrlichia spp. Antibodies against CDV and parvovirus were detected in 75% of Canidae and Felidae. Procyonidae were negative for CDV, although one Mustelidae was positive. TwoCanidae presented antibodies reactive to E. canis antigens. The high antibodies rates to CDV and parvovirus suggest the contact with both pathogens, however since no clinical history of disease are registered in the Zoo-UFMT, we can presume that carnivores have responded satisfactorily against the antigens. The low serological rates observed against Ehrlichia spp. may be resulted to the low occurrence of ticks among carnivores.(AU)

A ocorrência de anticorpos contra o vírus da cinomose canina (CDV), parvovírus e Ehrlichia spp. em carnívoros selvagens em cativeiro foi avaliada em um parque zoológico do centro oeste do Brasil. As amostras de soro foram coletadas entre 2007 e 2014 de 45 carnívoros. Os anticorpos foram avaliados por ensaio de neutralização de vírus para CDV, teste de inibição de hemaglutinação para parvovírus, imunofluorescência indireta e ensaio imunoenzimático ligado à enzima para Ehrlichia spp. Anticorpos contra CDV e parvovírus foram detectados em 75% de canídeos e felídeos. Procionídeos foram negativos para CDV, embora um mustelídeo fora positivo. Dois canídeos apresentaram anticorpos reativos aos antígenos de E. canis. As altas taxas de anticorpos para CDV e parvovírus sugerem o contato com ambos os patógenos, entretanto desde que nenhuma história clínica de doença está registrada no Zoo-UFMT, podemos presumir que os carnívoros têm respondido satisfatoriamente contra os antígenos. As baixas taxas serológicas observadas contra Ehrlichia spp. pode ser resultado da baixa ocorrência de carrapatos entre os carnívoros.(AU)

Anaplasmataceae em gatos (Felis catus) no município de Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro / Anaplasmataceae in cats (Felis catus) in the city of Campos dos Goytacazes, Rio de Janeiro

No Brasil, até o ano 2000, os agentes riquetsiais em felinos domésticos eram poucos conhecidos, existindo somente relatos esporádicos de Ehrlichia sp. As recentes pesquisas envolvendo biologia molecular e agentes riquetsiais confirmam a ideia de que estes agentes estão presentes nesses animais e, por este motivo, demonstram a necessidade de estudos mais detalhados no Brasil. O objetivo do presente trabalho foi a caracterização dos agentes da família Anaplasmataceae que acometem os felinos domésticos e esclarecer a importância dos felinos na cadeia epidemiológica das doenças riquetsiais por métodos moleculares e sorológicos associando a presença das doenças aos parâmetros clínicos e laboratoriais. Foram obtidas amostras sanguíneas de 60 felinos domésticos, independentes de sanidade, provenientes de atendimentos clínicos. Destas amostras foram realizados hemograma e bioquímica sérica, e os dados foram utilizados para preenchimento da ficha laboratorial. As amostras foram processadas para obtenção de concentração de células e soro, para realização da reação em cadeia pela polimerase (PCR) e reação por imunofluorescência indireta (RIFI), respectivamente, para identificação de agentes da família Anaplasmataceae. Os dados foram utilizados para análise descritiva para formação de frequências epidemiológicas e para realização de testes não-paramétricos pelo Qui-quadrado de Pearson (p≤5%) associando as alterações laboratoriais às infecções por Ehrlichia canis, Anaplasma platys e Anaplasma phagocytophilum. Os resultados obtidos revelaram a presença de 33,33% de agentes Anaplamastaceae na amostra populacional, sendo 8,33% para E. canis, 20% para A. platys e 10% para A. phagocytophilum. Foram realizadas as sorologias das amostras, pela imunofluorescência indireta, para verificação de amostras reagentes para A. phagocytophilum, sendo 8,33% amostras reagentes na amostra populacional. As alterações clínicas e laboratoriais mais frequentes em pacientes positivos por agentes Anaplasmataceae foram letargia, linfadenomegalia, mucosas pálidas, desidratação, trombocitopenia, hiperglobulinemia e hipoalbuminemia. Destes dados foram realizadas as correlações não paramétricas e não foram verificadas dependências das alterações laboratoriais com a presença de animais positivos para agentes Anaplasmataceae. A identificação dos agentes E. canis e A. platys visa esclarecer a doença na região, sendo instrumento de orientação da doença pelo médico veterinário ao proprietário para que tenha medidas adequadas de tratamento e prevenção. A presença de agentes A. phagocytophilum é considerada, sem dúvidas, uma notificação importante devido ao potencial zoonótico.(AU)

In Brazil, by the year 2000, rickettsioses in domestic cats were little known and there were only sporadic reports of Ehrlichia sp. Recent research involving molecular biology and rickettsioses confirm the notion of the presence of theses agents in cats and show the need for more studies in Brazil. The objective of this paper was to characterize agents belonging to the Anaplasmataceae family that affect domestic cats and to clarify the importance of cats in the epidemiology of rickettsioses by molecular and serological methods associating the presence of disease with clinical and laboratory parameters. Blood samples were obtained from 60 healthy domestic cats. Blood count and serum biochemical tests were performed, and the data were registered. The samples were processed to obtain cell concentration and serum to perform the polymerase chain reaction (PCR) and the indirect immunofluorescence assay (IFA) respectively, in order to identify agents of the Anaplasmataceae family. The data were used for descriptive analysis to obtain frequencies and to perform non-parametric tests with the chi-square test (p≤5%), besides the laboratory findings of infection by Ehrlichia canis, Anaplasma phagocytophilum and Anaplasma platys. The results revealed that 33.33% of the agents belonged to the Anaplasmataceae family, 8.33% for E. canis, 20% for A. platys, and 10% for A. phagocytophilum. Serology samples were examined by indirect immunofluorescence to check samples reacting to A. phagocytophilum, with positive reaction of 8.33%. The most frequent clinical and laboratory findings in patients positive for Anaplasmataceae agents were lethargy, enlargement of lymph nodes, pale mucous membranes, dehydration, thrombocytopenia, hyperglobulinemia and hypoalbuminemia. These data had non-parametric correlation and the laboratory changes and presence of positive cats was not interdependent. Identification of E. canis and A. platys revealed the disease in the region of Campos dos Goytacazes/RJ. The presence of A. phagocytophilum is considered an important finding due to its zoonotic potential.(AU)

Molecular epidemiology of Anaplasma platys, Ehrlichia canis and Babesia vogeli in stray dogs in Paraná, Brazil / Epidemiologia molecular de Anaplasma platys, Ehrlichia canis e Babesia vogeli em cães não domiciliados do Paraná

Hemoparasitic infections are tick-borne diseases, which affect animals and humans. Considering the importance of canine hemoparasitic infections in veterinary clinics, this study aimed to determine the occurrence of Anaplasma platys, Ehrlichia canis and Babesia vogeli in blood samples from 182 dogs not domiciled in the city of Pato Branco, southwestern region of Paraná State, Brazil, using polymerase chain reaction (PCR). The prevalence of A. platys and B. vogeli was 32.9% and 10.9% respectively, and A. platys infection prevailed (p<0.001). The number of dogs positive for A. platys was larger in Winter (p<0.05). All blood samples were negative for E. canis. In the dogs, infestation by Amblyomma cajennense predominated over that by Rhipicephalus sanguineus (p<0.001); but there was no significant association between PCR and the variables presence of ticks, sex and age. Dogs infected by A. platys and B. vogeli showed thrombocytopenia, lymphopenia and leukocytosis; but there was no correlation between such hematological changes and infection by hemoparasites. This appears to be the first molecular study that demonstrates the existence of A. platys and B. vogeli in dogs from the southwestern region of Paraná.(AU)

As hemoparasitoses são enfermidades transmitidas por carrapatos que afetam os animais e os humanos. Considerando a importância das hemoparasitoses caninas na clínica médica veterinária, este estudo objetivou determinar a ocorrência de Anaplasma platys, Ehrlichia canis e Babesia vogeli em amostras de sangue de 182 cães não domiciliados do município de Pato Branco, região sudoeste paranaense, Brasil, utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR). A prevalência de A. platys e B. vogeli foi de 32,9% e 10.9%, respectivamente, predominando a infecção por A. platys (p<0,001). Constatou-se um maior número de cães positivos para A. platys no período do inverno (p<0.05). Todas as amostras de sangue foram negativas para E. canis. Nos cães, a infestação por Amblyomma cajennense prevaleceu sobre a infestação por Rhipicephalus sanguineus (p<0,001), mas não foi observada associação significativa entre a PCR e as variáveis presença de carrapatos, sexo e idade. Cães infectados por A. platys e B. vogeli apresentaram trombocitopenia, linfopenia e leucocitose, porém não houve correlação destas alterações hematológicas com a infecção pelos hemoparasitas. Este é o primeiro estudo molecular que demonstra a existência de A. platys e de B. vogeli em cães da região sudoeste paranaense.(AU)

Ehrlichia canis DNA in domestic cats parasitized by Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l. ) ticks in Brazil ­ case report / Felinos domésticos parasitados por carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s. l. ) infectados por Ehrlichia canis no Brasil ­ relato de caso

Ectoparasites can transmit pathogens, including bacteria such as Ehrlichia sp., which trigger infectious diseases in domestic animals. Little is known about the epidemiology of feline ehrlichiosis, although several studies have focused on elucidating the pathogenesis and transmission of this disease. This paper presents the first mutual infection by Ehrlichia sp. between a domestic cat and a Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.) tick removed from the animal. The cat and tick were tested by Polymerase Chain Reaction (PCR) to detect the dsb gene, and the analyzed sequences revealed samples 100% identical to E. canis. Based on this report, we discussed the importance of cats as E. canis reservoirs s and their position in the cycle of transmission between dogs and cats in Brazil.(AU)

Os ectoparasitos são capazes de transmitir patógenos incluindo algumas bactérias, como a Ehrlichia sp., causando doenças em animais domésticos. Pouco se conhece sobre a epidemiologia da erliquiose felina, embora alguns estudos já tenham sido realizados para elucidar a sua patogenia e transmissão. Este trabalho relata a primeira infecção mútua por Ehrlichia sp. entre um felino doméstico e o carrapato Rhipicephalus sanguineus sensu lato (s.l.) removido deste animal. Ambos foram testados pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) para detectar o gene dsb, e as sequências analisadas confirmaram amostras 100% idênticas à E. canis. Baseado neste relato é discutida a importância dos gatos como vetores de E. canis e sua posição no ciclo de transmissão de carrapatos entre cães e gatos no Brasil.(AU)

Detection of a putative novel genotype of Ehrlichia sp. from opossums (Didelphis aurita) from Brazil

Abstract Erlichiosis affects humans and animals worldwide. Its distribution and prevalence depends on the presence of tick vectors and hosts in one geographic area. The aim of the present study was to investigate the occurrence of Ehrlichia spp. and Anaplasma spp. in opossums (Didelphis sp.) from the State of Rio de Janeiro, southeast Brazil. Blood samples from 37 animals were tested for these two pathogens using molecular methods. One animal (2.7%) was positive for Ehrlichia sp. by 16S rRNA-based nested PCR. In a phylogenetic analysis based on the 16S rRNA gene using the maximum likelihood method and the GTRGAMMA+I evolutionary model, we detected a novel Ehrlichia sp. genotype closely related to genotypes of E. canis previously reported in dogs from Brazil. To the authors knowledge, this is the first molecular detection of Ehrlichia sp. in opossums from this State in the southeastern region of the country.

Resumo A erliquiose afeta seres humanos e animais em todo o mundo. Sua distribuição e prevalência dependem da presença de vetores de carrapatos e hospedeiros em uma área geográfica. O objetivo do presente estudo foi investigar a ocorrência de Ehrlichia sp. e Anaplasma sp. em gambás (Didelphis sp.) do Estado do Rio de Janeiro, sudeste do Brasil. Amostras de sangue de 37 animais foram testadas para estes dois patógenos usando métodos moleculares. Um animal (2,7%) foi positivo para Ehrlichia sp. baseado em 16S rRNA-nested PCR. Em uma análise filogenética baseada no gene 16S rRNA usando o método de máxima verossimilhança e o modelo evolutivo GTRGAMMA + I, detectamos um novo genótipo de Ehrlichia sp. intimamente relacionado a genótipos de E. canis previamente relatados em cães do Brasil. Para o conhecimento dos autores, esta é a primeira detecção molecular de Ehrlichia sp. em gambás deste estado na região sudeste do país.

Epidemiological survey of Neorickettsia risticii in equids from the State of Rio de Janeiro, Brazil / Levantamento epidemiológico de Neorickettsia risticii em equídeos do Estado do Rio de Janeiro

Equine neorickettsiosis (EN), also known as Potomac Horse Fever, is a non-contagious disease caused by the bacterium Neorickettsia risticii of the Anaplasmataceae family. The objectives of this study were to detect the presence of anti-N. risticii antibodies by the indirect immunofluorescence assay (IFA) and of its DNA by qPCR in equids at high and low altitude regions in the State of Rio de Janeiro, Brazil, and to identify factors associated with seropositive equids by multiple logistic regression analysis. The frequency of anti-N. risticii antibodies was 16.05% (n=113/704). The animal age and breeding region were the factors that influenced the seropositivity rate for N. risticii in the equids (p<0.05). Equids from the lowland region had higher seropositivity (p<0.05; OR=5.87) compared to those of the mountain region. The presence of snails on the farm was a factor associated with this result (p<0.05; OR=2.88). In the lowland region, age of the animal and site of breeding were protective factors for the detection of antibodies anti-N. risticii in equids, with lower frequency of seropositivity in younger animals (p<0.05; OR=0.06) and in animals raised in dry areas (p<0.05; OR=0.22). The presence of the target DNA of N. risticii by qPCR was not observed in any of the samples tested. The existence of seropositive equids for N. risticii demonstrates a possible circulation of this agent in the studied area, and that the age related characteristics and equids breeding region are important factors regarding seropositivity in the State of Rio de Janeiro.(AU)

A Neorickettisiose equina (NE), também conhecida como Febre do Cavalo de Potomac, é uma doença não contagiosa causada pela bactéria Neorickettsia risticii da família Anaplasmataceae. Os objetivos deste estudo foram detectar a presença de anticorpos anti-N. risticii através da reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) e do DNA dessa bactéria através da qPCR em equídeos de regiões de alta e baixa altitude no Estado do Rio de Janeiro, Brasil; e identificar os fatores associados com a soropositividade dos equídeos através da análise de regressão logística múltipla. A frequência de anticorpos anti-N. risticii foi de 16,05% (n=113/704). Observou-se que a idade e a região de criação foram os fatores que influenciaram a taxa de soropositividade para N. risticii nos equídeos (p<0,05). Equídeos da região de baixada apresentaram maior soropositividade (p<0,05; OR=5,87) quando comparado aos criados em região de montanha. A presença de caramujos na propriedade foi um fator associado a este resultado (p<0,05; OR=2,88). Na região de baixada, animais mais jovens (p<0,05; OR=0,06), criados em áreas secas (p<0,05; OR=0,22) demonstraram serem fatores de proteção na detecção de anticorpos anti-N. risticii. Não foi observada a presença do DNA-alvo de N. risticii através da qPCR em nenhuma das amostras testadas. A existência de equídeos soropositivos para N. risticii demonstra a possível circulação desse agente na área estudada, e as características inerentes a idade e a região de criação dos equídeos são fatores importantes relacionados à soropositividade no estado do Rio de Janeiro.(AU)

Ehrlichia canis detection in dogs from Várzea Grande: a comparative analysis of blood and bone marrow samples / Detecção de Ehrlichia canis em cães domiciliados em Várzea Grande: análise comparativa entre amostras de sangue e medula óssea

ABSTRACT: The objective of this study was to compare the DNA detection of Ehrlichia canis in blood and bone marrow to determine the prevalence of the agent in Várzea Grande, Mato Grosso. Blood samples and bone marrow from 80 dogs of both sexes, different breeds and age, were collected and processed for a cross-sectional study performed using nested PCR. Of the 80 dogs, 61 (76.3%) had E. canis DNA in one of the samples. The buffy coat was positive in 42 dogs (52.5%) and the bone marrow was positive in 33 (41.3%). There was no significant association between the positive biological samples of either the buffy coat or bone marrow and the presence or absence of clinical signs (P=0.49). No risk factor was associated with infection in the studied area. The bone marrow samples were efficient for the molecular diagnosis of canine ehrlichiosis, particularly when there was a negative blood sample, although infection was present.

RESUMO: Este trabalho teve por objetivo comparar a detecção de DNA de Ehrlichia canis em amostras de sangue e medula óssea, além de determinar a ocorrência do agente em Várzea Grande, Mato Grosso. Amostras de sangue e medula óssea de 80 cães, de ambos os sexos, diferentes raças e idade, foram coletados em estudo seccional e processados para realização de nested PCR. Dos 80 cães, 61 (76,3%) apresentaram DNA de E. canis em uma das amostras pesquisadas. A capa leucocitária foi positiva em 42 (52,5%) e a medula óssea em 33 (41,3%). Não foi observada associação significativa com a positividade das amostras biológicas, sangue ou medula óssea, e a presença ou ausência de sinais clínicos (P=0,49). Nenhum fator de risco foi associado à infecção na área pesquisada. A amostra de medula óssea mostrou-se bom sítio para o diagnóstico molecular da erliquiose canina, principalmente quando da infecção com negatividade da amostra sanguínea.

Spleen evaluation using contrast enhanced ultrasonography and Doppler in dogs with subclinical ehrlichiosis / Ultrassonografia por contraste com microbolhas e Doppler na avaliação do baço de cães com erliquiose subclínica

The aim of this study was to evaluate the splenic parenchyma of dogs with subclinical ehrlichiosis using Doppler and contrast-enhanced ultrasonography and provide reference values for this organ in affected animals. Seventeen dogs naturally infected with E. canis were selected for this study. Splenic parenchyma echotexture and echogenicity, size and borders were determined by ultrasound scan. The vascular indices of the splenic artery were determined by Doppler. SonoVue, at 0.1mL per animal, was used in microbubble contrast-enhanced ultrasonography to determine wash in, wash out and peak enhancement time in the splenic tissue. B-mode ultrasonography revealed splenomegaly with rounded borders, heterogeneous echotexture and mixed echogenicity. The vascular indices of the splenic artery were: systolic velocity of 22.59±8.07cm/s, diastolic velocity of 5.25±4.66cm/s and resistance index of 0.71±0.14; values not yet reported in Veterinary Medicine. Contrast-enhanced ultrasonography recorded wash in time of 5.31±0.7s, peak enhancement time of 18.56±2.90s and wash out time of 94.56±35.21s. The combination of conventional ultrasonography of the spleen and hemodynamic evaluation by Doppler and contrast-enhanced ultrasonography is important for the diagnosis of canine ehrlichiosis and could help monitor the clinical evolution of subclinical cases.

O objetivo deste estudo foi avaliar o parênquima esplênico de cães com erliquiose na fase subclínica, por meio do Doppler e da ultrassonografia por contraste com microbolhas. Dezessete cães naturalmente infectados por E. canis na fase subclínica foram selecionados para este estudo. Por meio da ultrassonografia, avaliou-se a ecotextura, a ecogenicidade, o tamanho e os bordos do baço e, pelo Doppler, foram determinados os índices vasculares da artéria esplênica dos cães. Para a avaliação por contraste com microbolhas, foi utilizado SonoVue, na dosagem de 0,1mL por animal, e determinou-se o tempo de entrada e saída, bem como o pico de realce no tecido esplênico. Ao exame modo-B, foram observadas esplenomegalia com presença de bordas arredondadas, ecotextura heterogênea e ecogenicidade mista do baço. Ao Doppler, foram encontrados valores para os índices vasculares da artéria esplênica: velocidade sistólica: 22,59±8,07cm/s; velocidade diastólica: 5,25±4,66cm/s; e índice de resistência: 0,71±0,14, valores ainda não descritos em veterinária. Pela ultrassonografia com contraste, observaram-se valores para wash-in de 5,31±0.7s, pico de realce de 18,56±2.90s e wash-out de 94,56±35.21s. A ultrassonografia convencional do baço de cães com erliquiose, associada com a utilização do método Doppler e a ultrassonografia contrastada, é uma importante ferramenta na triagem diagnóstica e pode auxiliar a monitoração e a evolução de animais na fase subclínica.

Pathology of dogs in Campo Grande, MS, Brazil naturally co-infected with Leishmania infantum and Ehrlichia canis / Patologia de cães naturalmente coinfectados por Leishmania infantum e Ehrlichia canis em Campo Grande, MS, Brasil

Different parasites that commonly occur concomitantly can influence one another, sometimes with unpredictable effects. We evaluated pathological aspects of dogs naturally co-infected with Leishmania infantum and Ehrlichia canis. The health status of the dogs was investigated based on histopathological, hematological and biochemical analyses of 21 animals infected solely with L. infantum and 22 dogs co- infected with L. infantum and E. canis. The skin of both groups showed chronic, predominantly lymphohistioplasmacytic inflammatory reaction. The plasmacytosis in the lymphoid tissues was likely related with the hypergammaglobulinemia detected in all the dogs. The disorganization of extracellular matrix found in the reticular dermis of the inguinal region and ear, characterized by the substitution of thick collagen fibers for thin fibers, was attributed to the degree of inflammatory reaction, irrespective of the presence of parasites. In addition, the histopathological analysis revealed that twice as many dogs in the co-infected group presented Leishmania amastigotes in the ear skin than those infected solely with Leishmania, increasing the possibility of becoming infected through sand fly vectors. Our findings highlight the fact that the health of dogs infected concomitantly with L. infantum and E. canis is severely compromised due to their high levels of total plasma protein, globulins, alkaline phosphatase and creatine kinase, and severe anemia.

A infecção simultânea por parasitas de diferentes espécies pode resultar em alterações imprevisíveis. O presente estudo avaliou a patologia de cães naturalmente coinfectados por Leishmania infantum e Ehrlichia canis. A saúde dos cães foi investigada pelas análises histopatológicas, hematológicas e bioquímicas de 21 cães infectados somente por L. infantum e 22 cães coinfectados por L. infantum e E. canis. Observou-se uma reação inflamatória crônica, predominantemente linfohistioplasmocítica, na pele dos dois grupos. A plasmocitose, encontrada nos tecidos linfóides, provavelmente estava relacionada com a hipergamaglobulinemia observada em todos os cães amostrados. A desorganização da matriz extracelular da derme da região inguinal e da orelha, demonstrada pela substituição das fibras de colágeno espessas por fibras finas, foi relacionada com o grau de reação inflamatória, independente da presença de parasitas. Ainda, observamos duas vezes mais animais do grupo coinfectado apresentando formas amastigotas na pele de orelha pela histopatologia comparado ao número de cães infectados apenas por Leishmania, tornando-os desta forma mais infectivos aos vetores. Nossos resultados ressaltam que a saúde de cães coinfectados estava severamente comprometida devido aos altos níveis de proteína plasmática total, globulinas, fosfatase alcalina, creatina quinase e anemia acentuada.

Molecular and serological detection of Ehrlichia canis in naturally exposed dogs in Iran: an analysis on associated risk factors / Detecção molecular e sorológica de Ehrlichia canis em cães naturalmente expostos no Irã: uma análise dos fatores de risco associados

The general aim of this study, which was conducted for the first time in Iran, was to evaluate the seroprevalence and geographical distribution of Ehrlichia canis in a dog population in Iran, followed by molecular confirmation using PCR and sequencing. Blood samples were collected from 240 dogs in different areas of Alborz and Tehran Provinces and initially analyzed using the immunofluorescent antibody (IFA) test to detect anti-Ehrlichia canis IgG antibodies. Subsequently, nested PCR was performed based on a fragment of the 16S rRNA gene of E. canis on serologically positive samples. The results showed that 40/240 dogs (16.6%) presented anti-Ehrlichia canis IgG antibodies and that nine of the blood samples from the 40 seropositive dogs (22.5%) contained E. canis DNA, which was confirmed by sequencing. The seroprevalence of E. canis tended to be higher in purebred, one to three-year-old male dogs living in the Plain zone, in rural areas; however, this difference was not statistically significant.

O objetivo geral deste estudo, que foi feito pela primeira vez no Irã, foi avaliar a soroprevalência e distribuição geográfica de Ehrlichia canis em população de cães no Irã, seguida da confirmação molecular por meio de PCR seguida de sequenciamento. Amostras de sangue de 240 cães de diferentes áreas das Províncias de Alborz e Teerã foram coletadas e, inicialmente, analisadas pelo Reação de Imunofluorescência (IFA) para detecção de anticorpos IgG anti-Ehrlichia canis Subsequentemente, uma reação do tipo nested PCR baseada em um fragmento do gene 16S rRNA de E. canis foi realizada nas amostras sorologicamente positivas. Os resultados mostraram que 40/240 cães (16,6%) apresentaram anticorpos IgG anti- Ehrlichia canis e nove (22,5%) das amostras de sangue dos 40 cães soropositivos continham DNA de E. canis, confirmado por sequenciamento. A soroprevalência de E. canis, embora não estatisticamente significativa, mostrou uma tendência em se apresentar maior em cães machos com 1-3 anos, de raça pura, que vivem em zonas planas e áreas rurais.

Hematological values associated to the serological and molecular diagnostic in cats suspected of Ehrlichia canis infection / Valores hematológicos associados ao diagnóstico sorológico e molecular de gatos suspeitos de infecção por Ehrlichia canis

The literature contains several studies on feline ehrlichiosis. However, information about the characteristics of Ehrlichia infection in cats is still scanty. This study evaluated the association between Ehrlichia spp. infection and the hematologic data of 93 cats treated at the Federal University of Mato Grosso Veterinary Hospital in Cuiabá, state of Mato Grosso, Brazil. The presence of or exposure to Ehrlichia spp. infection was evaluated by Polymerase Chain Reaction (PCR) targeting the dsb and 16S rRNA gene of Ehrlichia, and by detection of anti-Ehrlichia canis IgG antibodies in Indirect Fluorescence Assay (IFA), respectively. Eight (8.6%) cats tested positive by PCR and the partial DNA sequence obtained from PCR products was a 100% match to E. canis. Forty-two (45.1%) cats showed antibody reactivity against Ehrlichia spp. Hematological alterations such as low erythrocyte count, thrombocytopenia, lymphopenia and monocytosis were observed in PCR positive cats. Among them, low erythrocyte counts were associated with IgG antibody titers of 40 to 640 and five cats also tested positive by PCR. Furthermore, PCR-positive cats showed a tendency to be lymphopenic. No correlation was found between age and sex, and no ticks were observed in any of the examined cats.

Diversos estudos sobre erliquiose felina vêm sendo relatados na literatura. No entanto, a caracterização da infecção por Ehrlichia em gatos ainda é escassa. O presente estudo objetivou avaliar a associação entre infecção por Ehrlichia e dados hematológicos em 93 gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso, em Cuiabá, Brasil. A presença de infecção por Ehrlichia spp. foi avaliada pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) visando à amplificação dos genes dsb e 16S rRNA de Ehrlichia e por Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI). Oito (8,6%) gatos demonstraram ser positivos pela PCR, sendo suas sequências parciais de DNA 100% idênticas à E. canis. Quarenta e dois gatos (45,1%) apresentaram anticorpos reativos contra Ehrlichia spp. Alterações hematológicas como baixas contagens de eritrócitos, trombocitopenia, linfopenia e monocitose foram observadas em gatos positivos pela PCR. Dentre essas, eritropenia foi associada em gatos com títulos de anticorpos IgG entre 40 e 640, sendo cinco destes positivos pela PCR. Adicionalmente, gatos positivos na PCR apresentaram uma tendência a serem linfopênicos. Não foram observadas associações entre a presença de infecção nos gatos e suas respectivas idades e sexo. Nenhum carrapato foi observado nos gatos examinados.

Occurrence of Ehrlichia canis and Anaplasma platys in household dogs from northern Parana / Ocorrência de Ehrlichia canis e Anaplasma platys em cães domiciliados da região norte do Paraná

Canine monocytic ehrlichiosis caused primarily by Ehrlichia canis and canine thrombocytic anaplasmosis induced by Anaplasma platys are important emerging zoonotic tick-borne diseases of dogs. There is evidence that these pathogens can also affect humans. This study evaluated the presence of E. canis and A. platys in blood samples collected from 256 domiciled dogs in the municipality of Jataizinho, located in north region of the State of Parana, Brazil, by PCR assay. The occurrence of E. canis and A. platys was 16.4% (42/256) and 19.4% (49/256), respectively; while 5.47% (14/256) of the dogs evaluated were co-infected by these two organisms. The presence of E. canis and A. platys was not significantly associated with the variables evaluated (sex, age, outdoor access, and presence of ticks during blood collection). Infection of dogs by E. canis was associated with anemia and thrombocytopenia, while infection induced by A. platys was related only to thrombocytopenia. Canine monocytic ehrlichiosis and canine thrombocytic anaplasmosis should be included in the differential diagnoses when these hematological alterations are observed during routine laboratory evaluation of dogs.(AU)

Erliquiose monocítica canina, causada principalmente por Ehrlichia canis, e anaplasmose trombocítica canina, devida a infecção com Anaplasma platys, são importantes doenças transmitidas por carrapatos que acometem os cães, com evidências que podem também acometer o homem. O presente estudo avaliou a ocorrência desses agentes em amostras de sangue de 256 cães domiciliados na cidade de Jataizinho, na região Norte do Paraná, Brasil, utilizando a técnica da Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). A ocorrência de E. canis e A. platys foi de 16,4% (42/256) e 19,4% (49/256), respectivamente, com 5,47% (14/256) dos animais apresentando coinfecção. Não foi observada associação significativa com as variáveis sexo, idade, acesso à rua e presença de carrapatos no momento da coleta de sangue. A infecção por E. canis teve relação com anemia e com trombocitopenia, enquanto a infecção por A. platys apresentou relação apenas com trombocitopenia. Com base nos resultados obtidos, reforçou-se a necessidade de que erliquiose e anaplasmose canina devem estar entre os diagnósticos diferenciais, quando da detecção de anemia e trombocitopenia em exames laboratoriais.(AU)

Implementation of a PCR-based method for the diagnosis of Ehrlichia spp, in canine in Medellin (Colombia) / Implementación de un método basado en PCR, para el diagnóstico de Ehrlichia spp., en caninos de Medellín (Colombia) / Implementação de um método baseado em PCR, para o diagnóstico de Ehrlichia spp., em caninos de Medellín (Colômbia)

Ehrlichiosis is a worldwide illness, endemic in tropical and subtropical countries where seroprevalence can reach up to 33% as it is the case in México and Israel. However, the low sensitivity of the serological tests used for diagnosis, 67% in tests with IFI, has led to a required searching for new alternatives to diagnose the disease quickly and effectively. PCR is one of these techniques that could provide high sensitivity and specificity. The target of this study was to implement the PCR test for the diagnosis of Ehrlichia spp., on blood samples from animals with suspected illness from veterinary clinics in the city of Medellin. 90 samples were taken, 33 samples from animals suspected of having symptoms and 57 from healthy animals as probable negatives. DNA from the Madrid strain was used as a positive control. The PCR was performed using as an example the protocol suggested by Aguirre et al (2004). EEC and ECB primers reported by Dawson et al (2004) were used (aquí el propio texto en español no está claro). In this study the 500pb band was amplified, corresponding to the 16s rRNA of Ehrlichia spp., in 11 samples of the animals with suspected illness, obtaining a presentation rate of 33.3%, confirming the presence of bacteria in the animals of the environment, and achieving the implementation of PCR for Ehrlichia spp. as a diagnostic tool in the city.

La Ehrlichiosis es una enfermedad de distribución mundial, es endémica en los países tropicales y subtropicales en donde la seroprevalencia puede llegar a ser hasta del 33%, como en México e Israel. La baja sensibilidad de las pruebas utilizadas para el diagnóstico, 67% en las pruebas con IFI, han llevado a la necesidad de buscar nuevas alternativas que permitan diagnosticar la enfermedad de manera rápida y eficaz. La PCR es una de estas técnicas que podría ofrecer una alta sensibilidad y especificidad. El objetivo de este trabajo fue implementar la prueba de PCR, para el diagnóstico de Ehrlichia spp., en muestras de sangre de caninos sospechosos provenientes de consultorios veterinarios de la ciudad de Medellín. Se tomaron 90 muestras, 33 de animales sospechosos de ehrlichiosis por sintomatología, y 57 de animales sanos como probables negativos. Se utilizó como control positivo el ADN de la cepa Madrid. La PCR fue realizada utilizando como ejemplo el protocolo sugerido por Aguirre et al. (2004). Se utilizaron los primers EEC y ECB reportados por Dawson et al. (1994). En este estudio se logró amplificar la banda de 500 pb correspondientes al gen 16s ARNr de Ehrlichia spp., en 11 muestras de los animales sospechosos, obteniendo una frecuencia de presentación del 33,3%, confirmando la presencia de la bacteria en los animales de nuestro medio, y logrando la implementación de PCR para Ehrlichia spp. como herramienta diagnóstica en nuestra ciudad.

A ehrlichiose é uma doença em todo o mundo, é endêmica em países tropicais e subtropicais, onde a soroprevalência pode atingir até 33%, como no México e Israel. A baixa sensibilidade dos testes utilizados para o diagnóstico, 67% nos testes de IFI, levaram à necessidade de buscar novas formas de diagnosticar a doença de forma rápida e eficaz. PCR é uma técnica de tal forma que poderia fornecer alta sensibilidade e especificidade. O objetivo deste trabalho foi implementar o teste de PCR para o diagnóstico de Ehrlichia spp., Em amostras de sangue de cães suspeitos de clínicas veterinárias da cidade de Medellín. Demorou 90 amostras, 33 amostras de suspeitos que apresentavam sintomas de erliquiose e 57 animais saudáveis como negativo provável. Foi utilizado como controle positivo de ADN a partir da estirpe de Madrid. A PCR foi padronizada utilizando o exemplo do protocolo proposto por Aguiar et al. (2004). Utilizou-se primers BCE CES e relatado por Dawson et al. (1994). Neste estudo foram amplificados de banda de 500 pb para o gene 16S rRNA do gênero Ehrlichia em 11 amostras de animais suspeitos, a obtenção de uma taxa de apresentação de 33,3%, o que confirma a presença de bactérias em animais nosso meio ambiente e obter a implementação de PCR por Ehrlichia spp. como uma ferramenta de diagnóstico em nossa cidade.